Pengembangan Metode Penapisan Enzimatik Terhadap Enzim Nitrilase Dan Gliserol Dehidratase

Pelaksana : Wien Kusharyoto, Dian Andriani, dan Yudiadi
Abstrak
Berdasarkan perubahan warna dari indikator pH karena terbentuknya proton yang terbentuk dalam reaksi enzimatik telah dikembangkan metode penapisan enzimatik terhadap enzim nitrilase.
Terbentuknya proton oleh peningkatan konsentrasi asam sebagai hasil dari hidrolisis senyawa nitril oleh enzim nitrilase mengakibatkan perubahan warna indikator pH yang dapat diamati secara visual. Larutan penyangga fosfat (10 mM, pH 7,2) dan indikator pH Bromothymol blue (0,01 %, pKa = 7,3) telah diseleksi sedemikian rupa sehingga keduanya memiliki affinitas yang sama terhadap proton. Di samping itu telah dikembangkan pula metode penapisan enzimatik terhadap enzim gliserol- atau diol dehidratase yang berdasarkan pada perubahan warna yang terjadi karena reaksi antara aldehid yang terbentuk dalam reaksi enzimatik dengan MBTH (3-Methyl-2- benzothiazolinonhydrazon).

Kata kunci: gliserol dehidratase, indikator pH, MBTH, nitrilase, penapisan enzim, DIPA 2007 P2 Biotek LIPI